孔板成像是分子生物實(shí)驗(yàn)中必不可少的實(shí)驗(yàn)方案，其中孔板成像還可以用于病毒噬菌斑的計(jì)算和計(jì)數(shù)。

其主要的原理是將各稀釋度的病毒液接種到單層細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境中，吸附***段時(shí)間后，在單層細(xì)胞上覆以瓊脂糖，病毒感染細(xì)胞并在細(xì)胞中增殖，使細(xì)胞破裂死亡。由于固體介質(zhì)的限制，釋放的病毒只能由***初感染的細(xì)胞向四周擴(kuò)展。經(jīng)過(guò)幾個(gè)增殖周期，便形成***個(gè)局限性病變細(xì)胞區(qū)，即病毒蝕斑。經(jīng)中性紅活細(xì)胞染料著色后，活細(xì)胞顯紅色，而蝕斑區(qū)細(xì)胞而不著色，形成不染色區(qū)域。病毒蝕斑如噬菌體感染細(xì)菌形成的噬菌斑。理論上，當(dāng)病毒液充分稀釋后，獲得的每個(gè)蝕斑均源于***初感染細(xì)胞的***個(gè)病毒顆粒，即蝕斑中的病毒為***個(gè)病毒體的繁殖后代品系，由此達(dá)到純化病毒的目的。除了可用于純化病毒以外，空斑實(shí)驗(yàn)還可用于干擾素、抗體中和病毒繁殖能力的實(shí)驗(yàn)。

而目前該類實(shí)驗(yàn)主要采用顯微鏡成像的方式進(jìn)行觀察和記錄。新***代的多功能生物分子成像設(shè)備Amersham ImageQuant 800能夠利用白光透射模式，對(duì)孔板中的病毒噬菌斑進(jìn)行真彩色成像光密度***定量和自動(dòng)化數(shù)據(jù)分析。

顯微鏡的拍照雖然方便，但是儲(chǔ)存數(shù)據(jù)和做定量分析非常麻煩。??

成像小助手可以幫助大***更好地得到和分析結(jié)果。采用新***代的多功能生物分子成像設(shè)備Amersham ImageQuant 800，它能夠利用白光透射模式，對(duì)噬菌斑進(jìn)行真彩色成像光密度***定量和數(shù)據(jù)分析。??

具體操作步驟：

 1 

打開設(shè)備，選擇OD measurement OD模式：選用OD白光透射托盤直接拍照即可得到結(jié)果。

 2 

機(jī)器會(huì)自動(dòng)保存真彩色圖片和TIF圖，以及TIF圖轉(zhuǎn)換為OD值精確定量。

 3 

打開IQTL高***多功能分析軟件進(jìn)行孔板等面積定量***分析即可。

(文章來(lái)源于儀器網(wǎng))