蛋白提取是許多實驗室都會涉及到的實驗，操作起來也是非常的簡單。

對細胞內及組織中蛋白質的分離提取均須先將細胞破碎，使其充分釋放到溶液中。不同生物體或同***生物體不同的組織，其細胞破壞難易不***，使用方法也不完全相同。主要的方法有：

（***）機械勻漿

（二）反復凍融

（三）超聲波

（四）表面活性劑處理

（五）低滲或高滲溶液

通常是將組織或細胞按照1：10（重量與體積比，w/v）的比例放入冰冷的蛋白提取液，破碎細胞后，將蛋白釋放入溶液，通過離心與其他雜質成分分離。

常用的蛋白質提取液包含以下成分：

（***）緩沖體系

緩沖體系主要用于穩定溶液的pH值，阻止少量酸堿對溶液pH值的影響，保持其與細胞內蛋白質生理狀態的pH值（7.0-7.5）基本***致，對維持溶液中蛋白質的穩定十分必要。常用的生物緩沖體系有Tris-base，Hepes和MOPS等等。  

（二）鹽金屬離子和金屬螯合劑

許多蛋白質在稀鹽溶液中才能溶解，因此提取液中需要包含***定的鹽離子。***般采用0.15mol/L左右的NaCl或KCl來模擬生理狀態下的離子強度。但是二價金屬離子如Ca2+、Mg2+多是金屬酶的組成部分，參與其活性調節，去除二價金屬離子能抑制這些酶的活性，對提取的蛋白質起保護作用。通常在蛋白質提取液中加入金屬離子螯合劑，例如乙二胺四乙酸(EDTA)，可以去除這些金屬離子。  

（三）還原劑

細胞***旦破碎，由于和氧接觸以及生物抗氧化劑被稀釋，導致很多蛋白質尤其是含巰基蛋白被氧化而失活。加入還原劑，如二硫蘇糖醇（DTT）、巰基乙醇（ME）、抗壞血酸（Vitamin C）等可以有效阻止巰基蛋白的氧化，保持其活性。  

（四）表面活性劑

表面活性劑，又稱去垢劑，為雙極性分子，同時具有疏水性與親水性基團。通過與“膜結合蛋白”疏水區的結合，增強其水溶性，使其能在水溶性提取液中穩定存在。常用的表面活性劑有陰離子型（如脂肪酸鹽、SDS及脫氧膽酸鈉等），陽離子型（如氧化芐烷基二甲基銨等）及非離子型（Triton X-100 、Tirton X-114、NP-40和Tween-20）等。非離子型表面活性劑比離子型溫和，不易引起酶失活，應用較多。對于膜結構上的蛋白，常采用膽酸鹽處理，兩者形成復合物，并帶上凈電荷，由于電荷的排斥作用能使膜破裂，起到破膜作用。此外，還有兩性表面活性劑，如CHAPS，加入后可避免蛋白質凍存導致的沉淀變性，多用于等點聚焦電泳。  

（五）酶抑制劑

細胞中普遍存在蛋白水解酶和磷酸酶，細胞破碎后能從膜性結構（溶酶體）中釋放出來。因而，蛋白提取時要注意防止蛋白酶引起的水解和磷酸酶（去磷酸化）等對蛋白質樣品的化學修飾。低溫是抑制酶活性、防止蛋白水解和修飾有效方式之***。加酶抑制劑也同樣起到保護作用。