微量分液儀操作注意事項
***、微量分液儀安全操作規范:規避人身與設備風險
個人防護
操作時佩戴實驗服、護目鏡及防化學手套(如丁腈手套),防止試劑飛濺或泄漏接觸皮膚。
處理揮發性或腐蝕性液體(如甲醇、濃鹽酸)時,需在通風櫥內操作,并佩戴防毒面具。
防觸電與防爆
確保設備接地良好,避免在潮濕環境或手濕時插拔電源;若設備外殼帶電,立即斷電并聯系維修。
遠離易燃易爆試劑(如乙醚、丙酮),分液區域禁止明火或靜電產生(如穿化纖衣物摩擦)。
生物安全防護
處理病原體或放射性樣本時,需在生物安全柜內操作,分液后對廢液和耗材進行高壓滅菌或專用處理。
避免交叉污染:對不同樣本分液時,更換吸頭或使用***次性分液頭,禁止重復使用未清洗的吸頭。
二、試劑與耗材管理:確保兼容性與穩定性
試劑選擇與預處理
粘度適配:高粘度液體(如甘油、聚乙二醇)需提前加熱至室溫或稀釋,降低分液阻力;低粘度液體(如水、DMSO)可直接使用。
揮發性控制:對乙醇、乙腈等易揮發試劑,分液后立即密封容器,減少體積損失;建議使用低揮發替代試劑(如異丙醇代替乙醇)。
顆粒物過濾:含懸浮顆粒的試劑(如細胞培養基)需通過0.22μm濾膜過濾,防止吸頭或泵管堵塞。
耗材匹配與檢查
吸頭規格:根據分液體積選擇專用吸頭(如20μL、200μL、1000μL),避免混用導致漏液或精度下降。
容器適配性:96孔板需選擇平底或錐底設計,確保液面檢測準確;避免使用變形、破損或非標準容器(如自制玻璃管)。
耗材質量:定期檢查吸頭、泵管等易損件的狀態,及時更換老化或變形的耗材;泵管建議每3個月更換***次。
三、操作過程控制:優化精度與效率
分液參數設置
速度控制:
吸液速度:高粘度液體選擇低速(如0.5mL/min),低粘度液體選擇高速(如2mL/min)。
分液速度:粘性液體降低速度至0.5mL/min,減少液滴掛壁;水性液體保持默認速度(如1mL/min)。
體積范圍:避免在量程極限(如***小體積或***大體積)附近操作,建議選擇量程的20%-80%以提高精度。
分液模式選擇
單通道模式:適用于逐孔分液或梯度稀釋(如ELISA加樣),需手動控制分液速度與間隔。
多通道模式:支持8/12/96通道同步分液,適配高通量場景(如藥物篩選),需預設分液序列并檢查孔位對齊。
自定義序列:通過軟件預設復雜分液流程(如多濃度加樣),需提前驗證序列邏輯是否正確。
實時監控與異常處理
屏幕顯示:關注當前分液體積、剩余液量和進度條,異常時設備自動暫停并報警(如泵管堵塞、液面過低)。
常見問題處理:
分液量不足:檢查泵管是否老化、吸頭是否堵塞或液面是否過低。
液滴掛壁:調整分液速度或增加噴嘴高度(參考設備手冊推薦值)。
孔間交叉污染:增加清洗次數或更換***次性分液頭。
四、校準與驗證:保障數據可靠性
校準周期與方法
日常校準:每周1次或更換試劑類型后需重新校準,使用與實驗試劑粘度相近的液體(如水、DMSO)。
校準方法:
重力法:通過分析天平稱量分液前后容器重量,計算實際體積(1mg≈1μL水)。
光電法:連接光電傳感器監測液滴體積,適用于動態分液場景(如連續分液96孔板)。
校準記錄:建立校準日志,包含校準日期、設備型號、量程、方法、平均體積、CV、偏差、操作人等信息。
精度驗證標準
重復性驗證:對同***孔連續分液10次,計算變異系數(CV),要求CV<1%(優質設備可達CV<0.5%)。
準確性驗證:使用標準移液器(如Eppendorf Research plus)對比分液結果,相對誤差(RE)需≤±1%(參考ASTM E1157標準)。
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